培養(yǎng)基配制的注意事項(xiàng),步驟及原則 | 培養(yǎng)基的配制和滅菌方法
日期:2023-12-18 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽:925 次
培養(yǎng)基的配制步驟和注意事項(xiàng)如下:
步驟:
- 按培養(yǎng)基的配方稱取各種藥品。
- 將各種藥品加水溶解,通常是加所需水量的一半。
- 若配固體培養(yǎng)基,按2%的用量稱取瓊脂,用水將瓊脂浸濕一下,用手?jǐn)D去瓊脂中過多的水分,加入2的溶液中。
- 加熱至瓊脂全部溶解,并補(bǔ)足所需的全部水量。
- 用1mol NaOH和1mol HCl調(diào)節(jié)pH至要求值。
- 用分裝器將培養(yǎng)基分裝入試管或三角瓶中,塞上棉塞并包扎,滅菌后備用。
注意事項(xiàng):
- 加熱熔化瓊脂時(shí),要不斷攪拌,以防糊底。
- 分裝時(shí)不要讓培養(yǎng)基沾染試管口或瓶口,以防培養(yǎng)過程中容易污染雜菌。
培養(yǎng)基的配制原則包括:
- 營養(yǎng)成分的配比:碳源和氮源的比例(C/N)要適當(dāng)。
- 適宜的酸堿度(pH值):配制培養(yǎng)基時(shí)pH的調(diào)節(jié)。
- 滲透壓:營養(yǎng)物質(zhì)要有適合的濃度。
- 培養(yǎng)基不能反復(fù)高溫滅菌。
- 稱不溶性固形物時(shí),應(yīng)單獨(dú)稱,若量少的可以與無機(jī)鹽一起稱,但一定要混勻再分裝。
- 一般情況下培養(yǎng)基用自來水配制。
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